Mémoires de Fin d’Etudes
Etablissement
Université d’Oran1 - Ahmed Ben Bella
Affiliation
Département de Biologie
Auteur
DJOUAD, Mokhtar Eddine
Directeur de thèse
BENSALAH Farid (Professeur)
Filière
Biologie
Diplôme
Magister
Titre
Caractérisation des différentes aptitudes des souches de la flore tellurique et marine du genre Rhodococcus isolées de sites contaminés
Mots clés
Rhodoccocus , aptitudes biologique , biosurfactants , cholestérol oxydase , PCR , ADRr 16S ,
Résumé
Dans notre travail on s’est intéressé plus au genre Rhodococcus qui se distingue par son aptitude de dégrader plusieurs polluants ou même faire la bioconversion et la biosynthèse d’une multitude de produits intéressants qui ont une valeur appréciée dans plusieurs domaines notamment les secteurs de l’environnement, industries et sciences médicales. Une soixantaine de souches ont été isolées à partir de différents sites en particulier des terres agricoles dans des régions variées, sites pollués (par de l’essence, gasoil, goudron, huiles résiduelle), pattes graisseuse et eau de mer polluées par des hydrocarbures. 34 souches ont été apparentées au genre Rhodococcus après criblage primaire selon les propriétés physico-chimiques, biochimique et une pré-identification macroscopique et microscopique, et selon des aptitudes biologique notamment l’activité lipolytique est mise en évidence grâce au test patch sur milieu Tween80-Agar, une vingtaine de souches ont présentés une activité lipolytique traduite par des halos opaque autour des patchs. 25 souches on présentées une activité catabolique sur le pétrole brute mis en évidence par des halos claire sur boite MSM vaporisées par le polluant (pétrole) et ensemencées par les différents isolats, ces derniers peuvent donner des biosurfactants actifs comme produits de synthèse ceci est démontrer en faisant une culture sur MSM liquide avec le pétrole brutes comme seule source de carbone 9 souches sur 12 testés on présenter un pouvoir de dégradation et on pu données un biofilm qualifiée de biosurfactant ce dernier a été extrait et conservé afin d’être étudié . Le calcul de l’indice d émulsions à démontrer des souches ayant un E24 égale a 54.54, 31.81, 27. 27 ceci représente des valeurs remarquables qui nécéssitent une investigation plus approfondie vis-à-vis leurs proprietés biotechnologiques D’autres part, 19 souches ont présenté une activité catabolique sur le cholestérol, cette activité est peut être due au Cholestérol oxydase, une enzyme contrôlé par le gène CHO dont l’amplification par des amorces spécifiques utilisées dans les techniques de biologie moléculaire à base de PCR on aboutie a une amplification pour deux souche témoin ( Pseudomonas) et pour une souche apparente au genre recherche LBTP2 L’optimisation d’une méthode d’extraction d’ADN de souches apparentés au genre Rhodococcus et une approche de diagnostique à base de biologie moléculaire reliée par PCR a été réalisée afin d’amplifier le gène de l’ADNr 16S de 1500 pb par l’utilisation d’un couple d’amorces universelles et un programme d’amplification approprié.
Statut
Signalé