Mémoires de Fin d’Etudes
Etablissement
Université de Tlemcen - Abou Bekr Belkaid
Affiliation
Département de Physique
Auteur
DEMBAHRI, Zahira
Directeur de thèse
FARIDA BENMOUNA (Professeur)
Co-directeur
CHRISTIAN ROLANDO (Maitre de conférence)
Filière
Physique
Diplôme
Doctorat
Titre
ELABORATION ET ETUDE DE PROPRIETES DES GELS ET MONOLITHES UTILISES DANS LES SYSTEMES DE SEPARATION DES PROTEINES
Mots clés
Protéines, séparation, cinétique, gels, monolithes, polymérisation, hydrodynamique, gonflement, éluant, morphologie.
Résumé
Cette thèse comporte plusieurs parties. La première partie porte sur l‟étude des colonnes capillaires à base de polymère pour répondre aux tendances actuelles à concevoir des dispositifs de séparation des protéines miniaturisés. Le chapitre 1 est consacré à une revue bibliographique de ce développement en mettant l‟accent sur les avantages présentés par les colonnes monolithiques à base de polymères. Le chapitre 2 est consacré à l‟étude expérimentale des colonnes monolithiques à base de lauryl métacrylate (LMA) et leurs caractérisations morphologiques et hydrodynamiques. Les résultats préliminaires concernent une étude de morphologique à sec par microscopie électronique à balayage. L‟étude des propriétés hydrodynamiques met l‟accent sur la composition du mélange de polymérisation, la nature et la composition de l‟éluant (eau/ACN) à travers les différentes colonnes préparées et les protocoles d‟injection de la phase mobile lors d‟une expérience de séparation. Ces études ont permis de déterminer la perméabilité du monolithe ainsi que le diamètre moyen des pores correspondant à différentes conditions expérimentales (composition de la phase mobile, débit utilisé, protocole d‟injection de la phase mobile, composition du mélange de polymérisation). Dans une troisième partie, nous présentons la synthèse, la caractérisation et les applications en électrophorèse de gels de PAAm modifiés par l‟ajout d‟un polysaccharide, le dextran avec pour objectif de trouver un substitut aux gels commerciaux comme le Duracryl. L‟accent est mis sur les effets de la masse molaire du dextran et sa concentration. La cinétique de polymérisation a été suivie en analysant la variation de l‟absorbance en fonction du temps mesurée par spectroscopie UV-visible. Comme il s‟agit d‟une polymérisation exothermique, la cinétique de réaction a été également étudiée en mesurant la variation de la température en fonction du temps. Le gonflement des gels synthétisés a été analysé dans l‟eau dé-ionisée et dans la solution tampon pour mimer le liquide physiologique dans lequel les protéines trouvent un milieu favorable pour leur solubilisation. Les applications des gels synthétisés ont été montrées en utilisant la technique de séparation des protéines de type SDS- PAGE. Dans la dernière partie de cette thèse, nous considérons la cinétique de polymérisation qui est décrite par un modèle dit de double réaction. La cinétique de séparation de phases est décrite par le modèle de Cahn-Hilliard_Cook développé dans le cas des alliages métalliques et adapté aux mélanges à base de polymères.
Statut
Signalé