Mémoires de Fin d’Etudes
Etablissement
Université de Sétif 1 - Ferhat Abbas
Affiliation
Département de Biologie et d’Ecologie Végétale
Auteur
بن سباع, كريمة
Directeur de thèse
رشيد محدادي (أستاذ محاضر)
Co-directeur
حمامة بوريش (أستاذ)
Filière
Biochimie
Diplôme
Doctorat
Titre
مـميهة الـحلقة β-lactam بموقـع نشط بعنصر الزنك ـ البحث عن سلالة بكتيرية مفرزة ـ إستبيان حساسية نشاطها لمستخلصات فينولية لبذور l.Nigella sativa
Mots clés
مميهات الحلقةβ-lactam بموقع نشط بفلز، Nigella sativa L.، الفلافونويدات
Résumé
تم تحضير مستخلصين فينوليين منزوع وغير منزوع الدسم من طحين بذور L. Nigella sativa ودراسة محتواهما الكمي من عديدات الفينول فكان في حدود 768 و 890.66 ميكروغرام مكافئ الحمض gallique/مل، على الترتيب؛ ومن الفلافونويدات فكان 18.00 و 18.35 ميكروغرام مكافئ rutine/مل، على الترتيب. كشفت دراستهما النوعية بواسطة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة عن تباين ضعيف فيما بينهما. كلاهما يحتوي على الحمض غاليك، كرستين، ريتين؛ زيادة على هذا يحتوي غير منزوع الدسم على كونفيرول و/أو فانلين. تم تحضير ثلاث مستخلصات خام لمميهة الحلقة-lactam β إبتداء من عزلة سريرية لـ E.coli ولـ K.pneumoniae ولـ Acinetobacter المقاومة للمضادات الحيوية من النوع β-lactams و تقدير محتواها البروتيني فكان في حدود 80.30 و 48.56 و 36.73 ملغ/مل مستخلص إنزيمي خام، على الترتيب. أظهرت الدراسة الحركية للنشاط الإماهي للمستخلصات الإنزيمية الخام للعزلة E.coli و K.pneumoniae و Acinetobacter أنها تميه النيتروسيفين بثابت ميخائيليس قدره 13.51 و17.73 و 9.42 ميكرومولار، على الترتيب؛ وبسرعات قصوى قدرها 308.64 و 108.93 و 168.35 ميكرومول/مغ /د، على الترتيب؛ مبديةً تفاوتاً في شراهة التثبيت وتفاوتاً في النشاط الإماهي. بيّن إستنساخ هذه الدراسة الحركية في وجود EDTA أو واحد من ثلاثة مثبطات كلاسيكية علاجية (الحمض clavulanique، sulbactam، tazobactam) أن النشاط الإماهي للأول و الثاني غير حساسان لـ EDTA وحساسان للحمض clavulanique (ثا. ميخائيليس= 20.87، 23.92 ميكرومولار؛ ثا. تثبيط = 18.43، 28.75 ميليمولار، على الترتيب) ولـ sulbactam (ثا. ميخائيليس= 23.31، 27.17 ميكرومولار؛ ثا. تثبيط =10.79 ، 14.7 ميليمولار، على الترتيب) ولـ tazobactam (ثا. ميخائيليس= 28.16، 25 ميكرومولار؛ ثا. تثبيط = 6.14، 11.32 ميليمولار، على الترتيب) إذ تُثبط هذه الجزيئات هذا النشاط الإماهي تثبيطا تنافسيا. بينت أيضا أن النشاط الإماهي للثالث حساس لـ EDTA (ثا. ميخائيليس= 21.27 ميكرومولار؛ ثا. تثبيط = 3.97 ميكرومولار) إذ يثبطه تثبيطا تنافسيا وغير حساس للمثبطات الكلاسيكية. يدعم هذا إمكانية إحتواء المستخلصين الإنزيميين الأول و الثاني على مميهة الحلقة β-lactam بموقع نشط بـحمض أمـيني سيرين، و الـمستخلص الإنزيمـي الثـالث عـلى مـميهة الـحلقة β-lactam بموقع نشط بأيون زنك. خلافا للمستخلص الإنزيمي للعزلة E.coli و K.pneumoniae، بين إستنساخ نفس الدراسة الحركية في وجود الـمستخلص الـفينولي مــنزوع وغـير مــنزوع الـدسم لــبذور l.Nigella sativa أن الـنشاط الإماهـي للـمستخلـص الإنزيمـي للعزلة Acinetobacter حساس لهما وأكثر حساسية للثاني (ثا. ميخائيليس= 24.5 ميكرومولار؛ ثا. تثبيط= 66.08، 0.38 ميكرومولار مكافئ الحمض gallique، مكافئ rutine، على الترتيب) إذ يثبط هذا النشـاط الإمــاهي تـثبيطا تـنافسيا. يمكن إرجاع هذا التثبيط إلـى خاصية الـفلافونويدات على إستخلاب أيونات الـعناصر الـفلزية و هذا بحكم أن الــنشاط الإمـاهي لـهذا الـمستخلص الإنـزيمي مـرده إحـتوائه عـلى مــميهة الــحلقة β-lactam بموقع نشط بأيـون زنـك.
Date de soutenance
2012
Cote
اطروحة رقم /310
Pagination
102 ص
Illusatration
رسومات - صور - بيانا
Format
قرص
Statut
Soutenue