Etablissement
Ecole Nationale Polytechnique
Affiliation
Département Génie de l'environnement
Auteur
Hadj Rabia, Samia
Directeur de thèse
Benzaid, A.
Co-directeur
Grib, Hocine
Filière
Génie de l’environnement
Diplôme
Magister
Titre
Purification et caractérisation partielle de la fraction 5 extraite d'un déchet biologique > : Étude de son marquage à l'iode-125
Mots clés
Génie de l'environnement ;Hydatidose ;Antigène 5 ;Purification ;Radiomarquage ;Iode125
Résumé
L’hydatidose est une maladie parasitaire due au développement chez l’homme et les herbivores d’une larve remplie d’un liquide « liquide hydatique ». Ce dernier qui est un déchet biologique constitue une bonne source d’antigènes parasitaires à usage diagnostique. Dans le présent travail, l’antigène 5, reconnu comme étant la fraction majeure et la plus immunogène de ce liquide hydatique a été purifié partiellement par précipitation au sulfate d’ammonium à 70% puis caractérisé par les méthodes physicochimiques et immunologiques. La séparation chromatographique du liquide hydatique humain par gel filtration a permis de visualiser quatre pics dont le troisième est caractéristique de l’antigène 5. Ce dernier a montré une mobilité électrophorétique typique de l’antigène 5 par immunoélectrophorèse en donnant un seul arc de précipitation vis-à-vis d’un pool de sérum de malades et celui du lapin immunisé par cet antigène. Une bande approximative de 66KDa a été révélée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en milieu dénaturant (SDS-PAGE) et dans des conditions non réductrices. Le radiomarquage de cet antigène à l’iode125 a donné un rendement satisfaisant de l’ordre de 63%. L’évaluation de l’antigène marqué a permis de déterminer une pureté radiochimique de 92.6% et une activité spécifique de 11.7 μCi/μg. L’étude de l’intégrité antigénique utilisant la technique de radioimmunodosage (RIA) a donné une liaison non spécifique de 16% et un pourcentage de fixation vis-à-vis du sérum de lapin anti fraction 5 de l’ordre de 63%. L’immunoréactivité testé avec les sérums de malades atteints par cette maladie a révélé une faible liaison spécifique comparée à celle obtenu avec l’antisérum de lapin. Ces résultats préliminaires relatifs à la purification et au marquage à l’iode -125 sont promoteurs et susceptibles d'être sans doute largement améliorés dans le futur. Pour se faire, nous avons été menés: - Dans un premier temps, à la récolte des kystes hydatiques humains et animaux du service thoracique de l’hôpital Mustapha et du service vétérinaire de l’abattoir de ruisseau. - A la purification et à la caractérisation partielle de l’antigène 5 extrait du liquide hydatique. - A la réalisation des essais préliminaires de marquage de cet antigène 5 à l’iode 125. - Et enfin à l’évaluation du traceur radioactif obtenu.
Date de soutenance
2010
Cote
M003810
Pagination
73 f.
Illusatration
Fig. Tabl.; A4
Format
pdf
Notes
Bibliogr.: 74 - 79 f. Annexe: [1 f.]
Statut
Soutenue